Раздел 01
Применение
Убивает опухолевые клетки в пробирке
PNC-27 — белок из фрагмента p53 и участка, проникающего через мембрану клетки. В пробирке он разрушает опухолевые клетки, не трогая здоровые, — формирует поры в их мембране за минуты. Это данные культуры клеток, а ещё не лечение человека.
▸Научная формулировка
PNC-27 несёт остатки 12–26 связывающего HDM-2 домена p53, соединённые с проникающей через мембрану лидерной последовательностью, и в культуре он лизирует опухолевые клетки, оставляя нетрансформированные клетки нетронутыми. Иммуноэлектронная микроскопия показала, что комплексы PNC-27–HDM-2 собираются в трансмембранные поры в клетках панкреатической карциномы MIA-PaCa-2, меланомы A2058 и крысиных клетках BMRPA1.TUC-3 при концентрации 100–150 мкг/мл (25–37,5 мкМ), формируясь за 3–10 минут при 37 °C, тогда как в фибробластах человека AG-13145 поры не образовывались. В отчёте 2025 года указан IC50 12,4 мкМ против линии рака шейки матки HTB-35 при сохранности нормальных клеток шейки матки. Всё это данные из культуры клеток; ни одно из них не является лечением человека.
Белок HDM-2 на поверхности опухоли
Опухолевые клетки несут белок HDM-2 на поверхности, а здоровые — нет; за него цепляется PNC-27. При остром лейкозе группа учёных нашла этот белок на раковых клетках, но не на стволовых клетках крови, и PNC-27 убивал раковые клетки у мышей.
▸Научная формулировка
Утверждение об избирательности опирается на то, что HDM-2 присутствует в плазматической мембране опухолевых клеток, но не нетрансформированных; в исследовании 2010 года в PNAS трансфекция мембрано-нацеленного полноразмерного HDM-2 в нетрансформированные клетки MCF-10-2A делала эти клетки чувствительными к PNC-27. При остром миелоидном лейкозе независимая группа из City of Hope обнаружила мембранный HDM2 на бластах ОМЛ и популяциях, обогащённых лейкозными стволовыми клетками, но не на нормальных гемопоэтических стволовых клетках, и сообщила, что PNC-27, введённый мышам in vivo, убивал как основную массу бластов, так и лейкозные стволовые клетки при первичной и вторичной трансплантации, сохраняя активность нормальных стволовых клеток. Отдельное исследование 2020 года показало некроз и высвобождение лактатдегидрогеназы в течение 4 часов в лейкозных линиях U937, OCI-AML3 и HL-60. Это наиболее подкреплённая часть литературы по PNC-27, но она по-прежнему ограничена культурой клеток и работой на мышах.
Опыты на мышах, не на пациентах
На клетках рака поджелудочной железы PNC-27 нарушал работу их митохондрий и вызывал гибель клеток. На мышах испытан не сам PNC-27, а его укороченный аналог PNC-28: он разрушал опухоли, хотя рост потом возобновлялся. Пациентов ещё не лечили.
▸Научная формулировка
Панкреатические линии, главным образом MIA-PaCa-2, — наиболее используемая модель для этого семейства пептидов, и исследование 2024 года сообщило, что PNC-27 также проникает в эти клетки и связывается с митохондриальными мембранами, вызывая нарушение митохондрий, причём гибель клеток блокировалась моноклональным антителом против p53-связывающего участка HDM-2. Опубликованные данные in vivo по поджелудочной железе относятся к более короткому аналогу PNC-28: у голых мышей две недели внутрибрюшинного введения PNC-28 разрушали одновременно трансплантированные опухоли BMRPA1.Tuc3 и блокировали рост опухолей в отдалённом участке, хотя после прекращения лечения опухоли возобновляли медленный рост. Ни один пациент с раком поджелудочной железы не проходил лечение PNC-27 ни в одном опубликованном исследовании.
Единичные опыты, не испытания
Есть опыты сочетания PNC-27 с химиотерапией: у мышей добавка к паклитакселу замедляла рост опухоли яичника, а в пробирке убивал клетки из опухолей двух пациенток. На людях сочетания ещё не испытаны — данные из узкого круга лабораторий.
▸Научная формулировка
Доказательства здесь скудны и опираются на единичные эксперименты. В одном исследовании 2017 года клетки рака яичника ID8, выжившие после паклитаксела, показали повышенную экспрессию MDM-2 и повышенную чувствительность к PNC-27, а добавление PNC-27 к еженедельному паклитакселу снижало рост опухоли в мышиной модели. Исследование 2023 года сообщило, что кетоновые тела снижали IC50 PNC-27, а также рапамицина и метотрексата в опухолевых клеточных линиях, а исследование ex vivo 2015 года обнаружило цитотоксичность PNC-27 в отношении первичных клеток, свежевыделенных из карцином яичника двух пациенток, и в отношении химиорезистентных линий рака яичника. Ни одна из этих комбинаций не испытывалась на пациентах, и работа исходит из небольшого круга сотрудничающих групп.
Экспериментальное средство, не лекарство
В реестре клинических испытаний ещё нет ни одного исследования PNC-27 на людях, и опубликованных испытаний нет. Данные — из одной сети лабораторий. PNC-27 — экспериментальное соединение: точность в пробирке не гарантирует пользу людям.
▸Научная формулировка
Запрос в ClinicalTrials.gov по PNC-27 как вмешательству не выявил ни одного зарегистрированного исследования, и ни одного опубликованного испытания PNC-27 на людях не найдено ни в PubMed, ни в Europe PMC. Каждый описанный выше результат получен в культуре клеток или на мышах, и большая часть публикаций происходит из одной сотрудничающей сети вокруг SUNY Downstate, Drexel и NomoCan Pharmaceuticals, при этом работа по острому миелоидному лейкозу — главное независимое исключение. PNC-27 — экспериментальное соединение, а не доступное или одобренное средство лечения рака, и доклиническая избирательность неоднократно не подтверждала клиническую пользу у других агентов.
Раздел 02
Механизм действия
Гибрид из фрагмента белка и проводника
- Пептид собрали из участка белка p53, которым тот стыкуется с белком HDM-2.
- К нему пришили последовательность-проводник пенетратин, переносящую пептид через мембраны и стабилизирующую его форму.
- В культуре все варианты убивали человеческие раковые линии, но не нормальные и не стволовые клетки пуповинной крови.
- Раковые клетки без гена p53 гибли так же легко, как клетки с нормальным или мутантным p53.
▸Научная формулировка
Химерный дизайн: остатки p53 12-26 на пенетратиновом лидере
PNC-27 был разработан на основе конформационного анализа сегмента p53, который связывается с HDM-2. Кановски и коллеги синтезировали пептиды, охватывающие остатки p53 12-26, 12-20 и 17-26, каждый из которых был связан на карбоксильном конце с последовательностью пенетратина KKWKMRRNQFWVKVQRG для переноса через мембраны и стабилизации спирали. Все три пептида были цитотоксичны для линий раковых клеток человека в культуре, но не для нормальных клеток или стволовых клеток пуповинной крови, и убивали p53-нулевые раковые клетки так же эффективно, как p53-мутантные или дикого типа. Позднее ЯМР показал, что остатки 17-26 сворачиваются в нативную HDM-2-связывающую конформацию, накладывающуюся на кристаллическую структуру p53-HDM-2 со среднеквадратичным отклонением 1,7-2,5 Å.
Почему гибнут только раковые клетки
- В мембранах раковых линий белка HDM-2 было в четыре-девять раз больше, чем в нераковых, при сопоставимом общем содержании.
- Сам белок p53 в мембранных фракциях не обнаружился вовсе.
- Светящийся пептид располагался рядом с HDM-2 только на мембранах раковых клеток.
- Когда HDM-2 искусственно вывели на мембрану нормальных клеток, те тоже стали гибнуть.
▸Научная формулировка
HDM-2 в плазматической мембране как переключатель селективности
Селективность связана с белком, который в норме находится внутриклеточно. В мембранных фракциях клеток MIA-PaCa-2, TUC-3, MCF-7 и A-2058 уровень HDM-2 был в 4-9 раз выше, чем в нетрансформированных линиях, хотя общее клеточное содержание HDM-2 было сопоставимым; сам p53 отсутствовал во всех мембранных фракциях. Флуоресцентно меченный PNC-27 колокализовался с HDM-2 на мембране только раковых клеток, а иммунопреципитация анти-HDM-2 выявляла меченый пептид. Трансфекция нетрансформированных клеток MCF-10-2A мембран-направленной конструкцией HDM-2-CVVK делала их чувствительными, с высвобождением ЛДГ более чем вдвое выше фонового уровня, тогда как конструкции без остатков 1-109 — p53-связывающего кармана — такого эффекта не давали.
Дырки в мембране и гибель без апоптоза
- Электронная микроскопия с золотыми метками выявила в мембранах обработанных раковых клеток кольцевидные структуры.
- Стенки колец составляли пары пептид-HDM-2, средний внутренний диаметр — около 34,5 нм; у нормальных фибробластов пор не было.
- Гибель сильно зависела от температуры: максимум при 37 °C и почти ничего при 17 °C.
- Клетки выпускали наружу фермент ЛДГ без роста активности каспаз, то есть без классического апоптоза.
▸Научная формулировка
Образование трансмембранных пор и каспаз-независимый некроз
Иммуно-сканирующая электронная микроскопия с двойной золотой меткой (6 нм для PNC-27, 15 нм для HDM-2) выявила кольцевидные структуры в мембранах обработанных раковых клеток, выстланные комплексами пептид-HDM-2 примерно в соотношении 1:1, со средним внутренним диаметром 34,5 ± 5,6 нм; в обработанных нетрансформированных фибробластах таких пор не наблюдалось. Гибель клеток была сильно температурозависимой, максимальной при 37 °C и почти отсутствовала при 17 °C, что согласуется с температуронезависимым связыванием с последующей температурозависимой латеральной агрегацией. Обработанные клетки высвобождали ЛДГ без повышения активности каспаз выше фонового уровня, а двойное мечение пептида показало наличие в мембранах раковых клеток целой молекулы, а не фрагментов, уже через 30 минут.
Вторая мишень — мембраны митохондрий
- Работа 2024 года с микроскопией живых клеток описала вторую точку приложения пептида.
- В клетках рака поджелудочной железы и меланомы митохондрии набухали, округлялись и разрывались примерно за пять минут.
- Лизосомы оставались целыми, а золотые метки помещали пептид именно на мембраны митохондрий.
- Нормальные фибробласты и нераковые клетки молочной железы ни одного из этих изменений не показали.
▸Научная формулировка
Разрушение митохондрий как вторая внутриклеточная мишень
Работа, опубликованная в 2024 году с использованием конфокальной микроскопии живых клеток с красителями MitoTracker и иммунозолотой просвечивающей электронной микроскопии, сообщила о втором сайте действия. В клетках карциномы поджелудочной железы MIA-PaCa-2 и меланомы A2058 митохондрии набухали, округлялись и затем разрывались в течение примерно пяти минут после воздействия, тогда как лизосомы оставались интактными, а иммунозолотое мечение выявляло PNC-27 на митохондриальных мембранах. Нормальные фибробласты AG13145 и нетрансформированные эпителиальные клетки молочной железы MCF-10-2A не демонстрировали ни одного из этих изменений. Авторы представляют связывание с плазматической мембраной HDM-2 и разрушение митохондрий как параллельные, а не последовательные вклады в гибель клетки.
Независимая проверка на клетках лейкоза
- Независимая группа нашла HDM2 на мембране бластов острого миелоидного лейкоза, но не на нормальных кроветворных стволовых клетках.
- Пептид убивал первичные бласты с мембранным HDM2 за 48 часов, не затрагивая нормальные клетки без этого белка.
- В опытах на мышах с пересаженными клетками медиана выживаемости выросла со 111 до 136,5 дней.
- Такую гибель авторы назвали некробиозом и связали её с разрушением белка E-cadherin и образованием пор.
▸Научная формулировка
Независимое воспроизведение при лейкемии и связь с E-кадгерином
Независимая группа обнаружила мембранный HDM2 на бластах ОМЛ человека и мыши, но не на нормальных гемопоэтических стволовых клетках, с наивысшей экспрессией во фракции, обогащённой стволовыми клетками CD34+CD38-. PNC-27 убивал мембран-HDM2-положительные первичные бласты со значениями IC50 11,6-31,6 мкМ через 48 часов, при этом щадя мембран-HDM2-отрицательные нормальные клетки CD34+, а в ксенотрансплантатах NSG-SGM3 медианная выживаемость увеличилась со 111 до 136,5 дня. Эта группа назвала гибель клеток некробиозом, а не апоптозом, и связала её с усиленным связыванием мембранного HDM2 с E-кадгерином, последующей деградацией E-кадгерина и порообразованием в мембране. Отдельная работа сообщила о некрозе в течение четырёх часов в клетках U937, OCI-AML3 и HL-60.
Раздел 03
Биологические пути
Данных по этому разделу пока нет.
Раздел 04
Информация о дозировке
Modified p53 HDM-2 binding domain peptide (MRR leader sequence + p53 residues 12-26)| Путь / система | Контекст | Исследованный диапазон | Ограничение |
|---|---|---|---|
| Нет — путь у человека не установлен | Ни одного зарегистрированного испытания PNC-27 | Дозы для человека нет. Поиск в реестре испытаний в августе 2026 года дал ноль исследований PNC-27 — через двадцать шесть лет после первых публикаций. | Всё, что ниже, — это чашка или мышь. Ни стартовой дозы, ни схемы, ни пути, ни потолка для человека не задано, и ни один регулятор их не рассматривал. |
| Внутрибрюшинно — мыши с опухолями | Пересадка опухолей мышам, в основном одна группа | В опытах на животных брали родственный пептид PNC-28 из вживлённой помпы: 10 мг на мышь за две недели. Цифра 40 мг/кг в сутки — от поставщиков. | Помпа в брюшине мыши — не укол человеку, испытывали не PNC-27, и почти вся эта работа принадлежит одной группе. |
| В чашке — только культура клеток | Линии раковых клеток и клетки, взятые у пациентов | 25–100 мкМ в чашке; около 75 мкМ убивали почти все клетки лейкоза. Половина клеток рака яичника гибла при 100 мкг/мл, матки — при 150 мкг/мл. | Это концентрации в жидкости вокруг клеток, у которых нет ни барьеров, ни кровотока, ни выведения; мкМ в лунке — это не миллиграммы для организма. |
| Подкожно — самостоятельное применение | Ходовая практика, а не находка | Протоколы продавцов расходятся: где-то 200–300 мкг трижды в неделю, где-то 1–2 мг раз в сутки 4–6 недель — примерно 2–29 мкг/кг при 70–90 кг. | Два набора цифр, которые не могут быть верны сразу оба, и ни один не из исследования. Какой уровень в крови даёт любой из них, ни у кого не измеряли. |
Результаты
Уровень заполнения шприца (100u)
Задайте значения для полей: Рекомендуемая доза на 1 кг.
Только для исследований. Эта информация предназначена исключительно для образовательных и исследовательских целей. Не является медицинской консультацией и не предназначена для самолечения.
Раздел 05
Протоколы
Протоколы с участием этого пептида пока отсутствуют. Все протоколы
Раздел 06
Стабильность и хранение
Лиофилизированный материал
Порошок хранят герметично, вдали от влаги: каталог реактива указывает 2 года при −80 °C и 1 год при −20 °C. Пептид растворим в воде — заявлено не менее 100 мг/мл. Рецензируемые работы описывают синтез и чистоту, но условий хранения не приводят.
После растворения
Маточный раствор держат в тех же герметичных условиях без доступа влаги: до 6 месяцев при −80 °C или до 1 месяца при −20 °C.
Раздел 07
Побочные эффекты и меры предосторожности
PNC-27 никогда не вводили человеку: все данные о безопасности получены на культурах клеток или мышах.
Избирательность к раку — это окно, а не неуязвимость
Лаборатория-разработчик сообщает, что PNC-27 не убивает нормальные клетки. Единственная полностью независимая лаборатория, измерившая дозозависимость на нормальных клетках, обнаружила, что PNC-27 убивает и их — при более высоких концентрациях: около 15-20 мкМ для опухолевых клеток против свыше 50 мкМ для нормальных. Это окно концентраций, а не неуязвимость здоровой ткани.
Клинические испытания ещё не начинались
Ни одного клинического испытания PNC-27 нигде не зарегистрировано. Разработчик заявил, что не завершил токсикологические исследования, необходимые перед испытаниями на людях, не подавал заявку на разрешение испытаний на людях и не начинал клинических испытаний.
Формальной токсикологии не проводилось
- По собственному заявлению разработчика, GLP-исследование токсичности не проводилось.
- Ни для одного вида не опубликовано данных о максимальной переносимой дозе, генотоксичности или репродуктивной токсичности.
- Особые группы — беременность, дети, нарушения работы почек или печени — не изучались вовсе.
Признаки токсичности — только на максимальной дозе
У части мышей на максимальной дозе (100 мг/кг/сут) в неопубликованных тестах отмечались потеря веса и диарея; другие группы её переносили. В отдельном исследовании токсичности таких признаков не было ни на одной дозе — только изолированное повышение печёночного фермента в двух группах с более высокими дозами. Не рецензировалось.
Механизм неясен, большинство исследований — из одной лаборатории
В литературе приводятся три разных, несовместимых друг с другом объяснения того, как PNC-27 убивает клетки. Большинство подтверждающих исследований выполнены лабораторией, которая создала пептид и владеет патентами на него. Единственное независимое исследование токсичности для нормальных клеток противоречит избирательности в её сильной форме.
Раздел 08
Регуляторный статус
FDA / США
Не одобрен; выпущено предупреждение о загрязнении
12 января 2017 года FDA предупредило пациентов и врачей не использовать PNC-27, заявив, что не оценивало безопасность или эффективность пептида и не одобряло его ни при каком заболевании. Лаборатория FDA обнаружила бактерию Variovorax paradoxus в растворе PNC-27 для ингаляций, а в более поздней пробе — Ralstonia insidiosa; продукт также продавался в виде растворов для внутривенного введения, ректальных и вагинальных препаратов.
Клиническая разработка
Только доклиника — испытаний на людях нет
Опубликованные исследования PNC-27 ограничены анализами на линиях раковых клеток и одним исследованием на мышах с ксенотрансплантатом, изучавшим механизм связывания пептида с мембранным HDM-2 и лизиса раковых клеток; ни одно исследование фазы I по безопасности или зарегистрированное испытание на людях не опубликовано. Заявки IND или NDA на это соединение FDA никогда не рассматривала.
WADA
Формально подпадает под категорию S0
Категория S0 — «Неодобренные субстанции» — охватывает любое фармакологическое вещество без действующего одобрения государственного регулятора для терапевтического применения у человека, включая соединения на стадии доклинической разработки; это определение применимо к PNC-27 независимо от того, назван ли он поимённо в запрещённом списке, а запрет действует постоянно.
Маркетинг PNC-27 как средства от рака не отражает никакого регуляторного одобрения, а заявления о его безопасности или эффективности, встречающиеся в сети, не оценивались ни FDA, ни EMA, ни каким-либо иным регулятором лекарственных средств — к утверждениям на страницах продавцов об этом пептиде стоит относиться с особой осторожностью.
Раздел 09
Научные исследования
- [1]Peptides from the amino terminal mdm-2-binding domain of p53, designed from conformational analysis, are selectively cytotoxic to transformed cellsKanovsky M, Raffo A, Drew L, Rosal R, Do T, Friedman FK, Rubinstein P, Visser J, Robinson R, Brandt-Rauf PW, Michl J, Fine RL, Pincus MR · Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America · 2001
- [2]Anticancer peptide PNC-27 adopts an HDM-2-binding conformation and kills cancer cells by binding to HDM-2 in their membranesSarafraz-Yazdi E, Bowne WB, Adler V, Sookraj KA, Wu V, Shteyler V, Patel H, Oxbury W, Brandt-Rauf P, Zenilman ME, Michl J, Pincus MR · Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America · 2010
- [3]PNC-27, a chimeric p53-penetratin peptide binds to HDM-2 in a p53 peptide-like structure, induces selective membrane-pore formation and leads to cancer cell lysisSarafraz-Yazdi E, Mumin S, Cheung D, Fridman D, Lin B, Wong L, Rosal R, Rudolph R, Frenkel M, Thadi A, Morano WF, Bowne WB, Michl J, Pincus MR · Biomedicines · 2022
- [4]The anti-cancer peptide, PNC-27, induces tumor cell lysis as the intact peptideSookraj KA, Bowne WB, Adler V, Sarafraz-Yazdi E, Michl J, Pincus MR · Cancer Chemotherapy and Pharmacology · 2010
- [5]Anti-cancer peptide PNC-27 kills cancer cells by unique interactions with plasma membrane-bound hdm-2 and with mitochondrial membranes causing mitochondrial disruptionKrzesaj P, Adler V, Feinman RD, Miller A, Silberstein M, Sarafraz-Yazdi E, Pincus MR · Annals of Clinical and Laboratory Science · 2024
- [6]Targeting cell membrane HDM2: a novel therapeutic approach for acute myeloid leukemiaWang H, Zhao D, Nguyen LXT, Wu H, Li L, Dong D, Troadec E, Zhu Y, Hoang DH, Stein AS, Ghoda L, Sanchez J, Kortylewski M, Kuo YH, Marcucci G · Leukemia · 2020
- [7]Targeting membrane HDM-2 by PNC-27 induces necrosis in leukemia cells but not in normal hematopoietic cellsThadi A, Lewis L, Goldstein E, Aggarwal A, Khalili M, Steele L, Polyak B, Seydafkan S, Bluth MH, Ward KA, Styler M, Campbell PM, Pincus MR, Bowne WB · Anticancer Research · 2020
- [8]Poptosis or peptide-induced transmembrane pore formation: a novel way to kill cancer cells without affecting normal cellsPincus MR, Silberstein M, Zohar N, Sarafraz-Yazdi E, Bowne WB · Biomedicines · 2024
Раздел 10
Часто задаваемые вопросы
В клеточной культуре — да, и неоднократно: он лизирует линии клеток рака поджелудочной железы, меланомы, лейкоза и других опухолей, не затрагивая нормальные клетки в той же чашке, а исследования с визуализацией показывают формирование пор в мембранах раковых клеток в течение минут. У мышей одна независимая группа обнаружила, что он убивает клетки острого миелоидного лейкоза, включая лейкозные стволовые клетки, не затрагивая нормальные кроветворные стволовые клетки. Ничего из этого не тестировалось на человеке с раком.
Нет. Поиск на ClinicalTrials.gov в 2026 году не нашёл ни одного зарегистрированного исследования PNC-27, спустя более двух десятилетий после первых публикаций о нём, и ни одного опубликованного испытания на людях не встречается ни в PubMed, ни в Europe PMC. Все результаты, сообщённые по этому пептиду, получены в экспериментах на клеточных культурах или мышах.
Он построен из фрагмента p53, связывающегося с белком HDM-2, соединённого с сегментом, помогающим ему проникать через мембраны. HDM-2 в нормальных клетках находится внутри, но появляется на внешней поверхности нескольких изученных типов раковых клеток — в одном отчёте его уровень в мембранах раковых клеток был в 4–9 раз выше, чем в нетрансформированных клетках, — и PNC-27 связывается с этим поверхностным HDM-2, пробивая поры в мембране, что и предлагается в качестве источника его избирательности.
Только в клеточной культуре, плюс работа на мышах с использованием родственного, более короткого пептида PNC-28, а не самого PNC-27, — в этом исследовании две недели инъекций уничтожили пересаженные опухоли поджелудочной железы, хотя после прекращения лечения рост медленно возобновлялся. Ни один пациент с раком поджелудочной железы не получал PNC-27 ни в одном опубликованном исследовании.
Дозы для человека не существует — ни одно испытание её никогда не устанавливало. В клеточной культуре против разных линий рака использовались концентрации 25–100 микромолярно; у мышей родственный пептид PNC-28 вводился непрерывно из имплантированной помпы, а не инъекциями. Протоколы самостоятельного применения, циркулирующие вне рамок каких-либо исследований, расходятся между собой примерно в десять раз.
Оба сочетают связывающий p53/HDM-2 фрагмент с проникающим через мембрану лидером, полученным по одному и тому же конструкторскому подходу. PNC-28 — вариант, использованный в опубликованных экспериментах на мышах с опухолями поджелудочной железы; PNC-27 — вариант, лежащий в основе большинства работ с клеточными культурами и лейкозом. Ведут ли себя оба варианта одинаково в живом организме, напрямую не сравнивалось в доступных источниках.