MGF: Guía Práctica de Investigación y Uso

Trabajar con el Factor de Crecimiento Mecano nativo presenta desafíos únicos que lo distinguen de la mayoría de los demás péptidos de investigación. Su vida media extremadamente corta en suero, medida en minutos en lugar de horas, significa que las prácticas estándar de manejo de péptidos deben adaptarse para garantizar que el compuesto llegue a su tejido diana en forma biológicamente activa. La reconstitución de MGF requiere especial cuidado debido a la susceptibilidad del péptido a la degradación. Comience con un vial liofilizado almacenado a menos 20 grados Celsius y permita que se equilibre a temperatura ambiente durante aproximadamente 5 a 10 minutos. Dado que MGF se usará inmediatamente después de la reconstitución en la mayoría de los protocolos, el agua bacteriostática es el vehículo de reconstitución estándar. Para un vial típico de 2 miligramos, agregar 2 mililitros de agua bacteriostática produce una concentración de 1000 microgramos por mililitro. La diferencia crítica entre la administración de MGF y la de otros péptidos es el requisito absoluto de inyección intramuscular directamente en el músculo diana. La inyección subcutánea de MGF nativo es esencialmente ineficaz porque el péptido se degrada en el tejido subcutáneo y el torrente sanguíneo antes de poder alcanzar cualquier tejido muscular distante. En investigaciones con roedores, esto implica inyección en el vientre del músculo diana, típicamente el tibial anterior, gastrocnemio o cuádriceps, utilizando una jeringa de aguja fina. La dosificación de investigación del MGF nativo en estudios preclínicos publicados ha oscilado típicamente entre 5 y 50 microgramos por sitio de inyección para modelos de roedores. El momento de la administración de MGF en relación con la carga o el daño muscular es una variable experimental importante. En la fisiología natural de la adaptación muscular, la expresión del ARNm de MGF alcanza su punto máximo dentro de las primeras horas después de la carga mecánica y disminuye antes de que aumente la expresión de IGF-1Ea. Los investigadores que estudian el papel de MGF en la adaptación al ejercicio típicamente administran el péptido dentro de 1 a 4 horas después del protocolo de ejercicio o carga mecánica. El almacenamiento del MGF nativo requiere estricta atención al manejo de la temperatura. El polvo liofilizado debe almacenarse a menos 20 grados Celsius, donde mantiene estabilidad durante aproximadamente 12 meses. Una vez reconstituido en agua bacteriostática, la solución debe usarse inmediatamente en condiciones ideales. Las consideraciones de diseño experimental para la investigación de MGF deben tener en cuenta varios factores específicos de este péptido. Primero, debido a que MGF se inyecta localmente en músculos específicos, los músculos contralaterales pueden servir como controles internos. Segundo, la naturaleza transitoria de la exposición a MGF significa que las medidas de resultado deben cronometrarse adecuadamente. La activación de células satélite puede evaluarse mediante la incorporación de BrdU o EdU a las 24 a 48 horas después de la administración de MGF, mientras que la hipertrofia y regeneración de miofibras requieren períodos de observación más largos de 1 a 4 semanas.